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環署環檢字第020號

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~~~ Coliscan Easygel 方法概述 ~~~

Easygel 方法概述

Coliscan MF 方法概述

操作圖示範例

樣品處理程序

棄置處理程序

◎ Easygel 方法概述

一.    原理：

Easygel 是專利配方使用會產生顏色的化學物和營養劑調製而成，利用大腸桿菌群（coliforms）和大腸桿菌（E. coli）所產生的不同顏色很容易加以區分辨別。它不是瓊脂卻是瓊脂的代替品，非常適用於傾注平面（pour plate）、擦抹平面（swab plate）或劃線平面（streak plate）等培養技術，它們只需把少量的樣品直接加入培養基即可。這個 Easygel 的方法也可用在其他微生物學的研究，包括空氣品質的試驗和其他細菌和真菌類的實驗。

二.  適用範圍：

液體樣品：飲用水、地表水、飲料

固體樣品：食品、廚房衛生、室內環境衛生

空氣樣品：大氣品質、室內空氣

三.  測試步驟：

1. 依測試目的及欲檢測微生物選擇適當之產品種類(參考二.適用範圍)

2. 依測試對象(液體、固體、空氣)選擇樣品處理程序

3. 將欲使用之培養皿以油性筆加註樣品編號，以利識別

4. 使用已滅菌之滴管，取適量水樣(或依前處理規定) 置入培養基瓶內

5.  輕輕搖動瓶內液體使混合均勻

6. 將混合液倒入已標示編號之培養皿中

7. 蓋上蓋子，輕輕搖動使培養基均勻分佈於培養皿中 (注意: 勿將液體滲出或流入蓋中)

8. 無須等待皿內液體凝固，培養皿即可直接正向放入恆溫箱或室內溫度較高地區，一般凝固時間約為40分鐘

9. 培養時間: 35℃ 24小時 或 室溫下48小時

四.  觀察結果：

◎ Coliscan MF方法概述 

一.    原理：

Coliscan MF這個方法對要檢測大腸桿菌群（coliforms）和大腸桿菌（E. coli）的大量液體樣品最適合，它甚至可檢測出 微量的大腸桿菌群。菌落會長在培養皿上的一個襯墊，此襯墊將被放在處理過的培養皿中並浸泡在 Coliscan-MF 液體培養基裡

二.    適用範圍：

飲用水、地表水或經過處理的水（水樣中 E.col i和 Coliform 含量較少者）

產品名稱：Coliscan MF

編    號：250MF

檢測項目：同時檢測大腸桿菌（E.coli）和大腸桿菌群（Coliform）

三.  測試步驟：（檢測過程中應使用無菌之器具，千萬勿以手直接接觸樣品，以免污染了樣品）

（1）調配需要的樣品水

1.取10mL的樣品（0次水）加入90mL的稀釋水成為稀釋10倍（10¹）的樣品水（1次水）。

2.取10mL的1次水加入90mL的稀釋水成為稀釋100倍（10²）的樣品水（2次水）。

3.取10mL的2次水加入90mL的稀釋水成為稀釋1000倍（10³）的樣品水（3次水）。

＊樣品自採樣區運送回來過程需要1小時以上者，必須先以4℃冷藏直到倒入培養皿中。

＊請依所檢測的對象取適當、不同的稀釋倍數檢測之。

（2）取出培養皿貼上適當的樣品資料標籤，或用油性筆寫上樣品資料。

（3）每個附有吸收墊的培養皿中加入2mL的Coliscan 培養基。

（4）過濾程序：

a.以瓦斯噴槍消毒過濾器具。

b.加入無菌水冷卻消毒過濾器具。

c.裝上濾紙，再加入無菌水以檢查無漏水之虞。

d.開始過濾，可先加些無菌水再加入10 mL的樣品水，以免試驗水樣不慎直接沾到過濾器壁面。（如果是飲用水直接加入100mL）

（5）取出濾紙直接置入上述培養皿中的吸收墊上。

（6）在35℃（95℉）培養時需要24小時。

四.  觀察結果：

1.計算培養皿裡所有紫藍色菌落數（忽略任何淡藍色、藍綠色或白色菌落），此即為大腸桿菌數（E.coli）。

2.計算培養皿裡紫藍色+粉紅色菌落數（忽略任何淡藍色、藍綠色或白色菌落）則為大腸桿菌群數（coliforms）。

3.如圖示

※ 使用過後器皿於正常棄置前之處理方法 (可依以下任一方式執行)

(1)      以滅菌斧滅菌

(2)      將使用過之培養瓶、培養皿封存於烤箱專用袋中，加熱至300⁰F 45分鐘

(3)      將使用過之培養瓶、培養皿置於大型鍋內，加滿水(須蓋過器皿)加熱沸騰 45分鐘

(4)      在每一培養皿中倒入5mL(約一茶匙)漂白劑，至少放置5分鐘後，置於密封袋內

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